影响分离的因素与提高
反相高效液相色谱柱柱效的途径：
（1）液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍左右，故降低传质阻力是提高柱效主要途径。
（2）由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。
（3）液相色谱中，不可能通过增加柱温来改善传质。
（4）恒温改变淋洗液组成、极性是改善分离的最直接的因素。
（5）流速大于0。5cm/s时，H～u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速，柱效提高不是很大。但在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。
（6）气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。
避免反相高效液相色谱柱过高的柱压：
虽然色谱柱能耐受的压力可达6000psi（磅/平方英寸），但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命，避免的方法是：
（1）柱压过高时，尽可能采用较小的流速，以不超过柱最大允许压力的一半为宜。
（2）当流速较大时，应采取流速梯度的办法使流速分步到位。
（3）使用手动进样阀时，进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时，柱切换要避免在高压下进行。
