目标化合物在液相色谱中的保留取决于该物质与流动相和固定相间的作用强度。流动相是整个液相色谱分离过程中的“血液"，它对组分有亲和力，并参与固定相对组分的竞争，因此流动相的选择直接影响组分的分离度。

反相色谱是大多数样品分析的shou选分离模式，该模式一般比其他液相色谱模式的普适性更好、更方便、更容易获得令人满意的分离效果。在反相色谱中，一般使用非极性/弱极性键合固定相色谱柱，如C18柱、苯基柱等。

流动相的选择通常以水相（包括加入一定量的酸、碱、无机盐缓冲液等）做基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶的如甲醇（质子给体）、乙腈（质子受体）、四氢呋喃（偶极溶剂）等极性溶剂，其极性及其K值（分配系数）和分离选择性有显著影响。下表列出一些常用溶剂的极性参数p’。

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