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亲和层析填料 标签亲和填料

简要描述:

标签亲和填料主要是纯化带标签的蛋白。通过人工构建蛋白时,在蛋白上增加特定标签,就可以用专门的填料去纯化此蛋白。

型号:标签亲和填料

更新时间:2022-06-16

浏览次数:2275

详细介绍

(1)His 标签蛋白纯化填料

His标签通常为构建蛋白时,在蛋白N或者C端添加的6个组氨酸标签。蛋白表达出来之后,就会带有6个组氨酸头或者尾巴 , 此类蛋白通常使用金属鳌合亲和填料进行纯化。利用过渡金属离子与组氨酸标签的相互作用,从而将蛋白纯化出来。此类填料纯化带标签的蛋白和包涵体蛋白
非常简单方便。

根据配基鳌合金属离子不同 ,可分为 Ni、Co、Cu、Zn 等几种亲和填料 。举例 ,Ni 亲和填料主要有 Ni IDA Welchrom 6B、Ni IDA Welchrom 6FF、Ni NTA Welchrom 6B、Ni NTA Welchrom 6FF、Ni NTA Welchrom 6B、Ni Cel Welchrom 6B、Ni Cel Welchrom 6FF、Ni Welchrom HP 等几种填料。Ni IDA Welchrom 6B、Ni IDA Welchrom 6FF 配基为亚氨基二乙酸 ,是一种非常悠久的 Ni亲和填料,由于 Ni 离子与配基鳌合键较少,容易受到小分子的攻击而使 Ni 容易脱落。但其载量也相对较高。Ni NTA Welchrom 6B、Ni NTA Welchrom 6FF 配基为氮川三乙酸,较 IDA 结合 Ni 离子牢固一些。Ni Cel Welchrom 6B、Ni Cel Welchrom 6FF 为自主研发的配基,与 Ni 结合能力更强,可以耐受碱、EDTA、DTT、高浓度尿素和盐酸胍等苛刻恶劣的溶液环境。样品可以无需处理直接上样,非常简单方便。但其载量会较其他类型低。Ni Welchrom HP 属于颗粒为 30μm 的填料,其分辨率和载量会更高一些,分离纯化效果也更好。
19体育登录也有未鳌合金属离子的填料,为 Chelating Welchrom 6FF  和 IMAC Welchrom 6FF ,分别相当于未鳌合 Ni 离子的 Ni IDA Welchrom 6FF 和 Ni NTA Welchrom 6FF。客户可以根据需要自行鳌合不同的金属离子,如 Ni 、Cu 、Co、Zn 等。

(2)MBP 标签蛋白纯化填料
将麦芽糖结合蛋白与目的蛋白融合表达,通过麦芽糖结合蛋白和填料上麦芽糖配基特异性结合,将蛋白纯化出来。19体育登录主要有Dextrin Welchrom 6FF 等。

(3)生物素标签蛋白纯化填料

根据生物素与链霉亲和素的特异性结合原理,将链霉亲和素当做配基结合到填料上,可以纯化生物素化的蛋白。19体育登录主要的填料类型有 Streptavidin Welchrom 6FF 等。

此外,还有蛋白 A 的标签蛋白,可以用 IgG Welchrom 4FF 进行纯化;Flag 标签蛋白、HA标签蛋白、Myc 标签蛋白、StrepII 标签蛋白等。

 


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